《少女爱上姐姐》是一部以女装少年为主角的校园恋爱喜剧作品。故事围绕主人公宫小路瑞穗展开，他因祖父的遗愿被迫以女性身份转入名门女校圣应女学院就读。瑞穗出身贵族家庭，容貌清秀，举止优雅，加之从小接受贵族教育，使得他即使以男儿身扮女装也毫无违和感，很快成为校园瞩目的焦点。 　　在圣应女学院，瑞穗结识了性格各异的同学，包括活泼开朗的十条紫苑、温柔体贴的御门玛利亚以及高傲强势的周防院奏。瑞穗以“学姐”身份与她们相处，在帮助他人解决烦恼的过程中，逐渐被少女们所依赖和喜爱。然而，随着时间推移，瑞穗的真实性别成为他内心的负担，尤其当某些女生对他产生超越友谊的感情时，他陷入了深深的矛盾。 　　故事以轻松幽默的基调展开，同时探讨了性别认知、自我认同与青春期情感等深刻话题。瑞穗在维持假象与坦诚自我之间挣扎，最终在朋友们的理解与支持下，找到了属于自己的答案。作品通过细腻的情感描写和喜剧冲突，展现了青春期少年少女们对爱与成长的思考。